{"id":13865,"date":"2021-11-04T10:22:14","date_gmt":"2021-11-04T13:22:14","guid":{"rendered":"https:\/\/gia.org.br\/portal\/?p=13865"},"modified":"2021-11-04T10:27:57","modified_gmt":"2021-11-04T13:27:57","slug":"as-fronteiras-do-conhecimento-desafios-na-padronizacao-de-tecnicas-de-ultima-geracao","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/gia.org.br\/portal\/as-fronteiras-do-conhecimento-desafios-na-padronizacao-de-tecnicas-de-ultima-geracao\/","title":{"rendered":"As fronteiras do conhecimento: desafios na padroniza\u00e7\u00e3o de t\u00e9cnicas de \u00faltima gera\u00e7\u00e3o"},"content":{"rendered":"\t\t
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Por: Paula Valeska Stika<\/strong><\/p>\t\t\t\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t\t\t<\/div>\n\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t<\/div>\n\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t<\/section>\n\t\t\t\t

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Em todos os produtos e servi\u00e7os que consumimos regularmente \u00e9 normal esperarmos consist\u00eancia em diferentes lotes. Ou seja, o produto produzido hoje ter\u00e1 a mesma qualidade daquele que ser\u00e1 produzido na pr\u00f3xima semana ou m\u00eas. Isso ocorre quando tais diferen\u00e7as s\u00e3o inerentes \u00e0 diferentes marcas ou fornecedores. Um exemplo real \u00e9 que, quando adquirimos um smartphone<\/em> com um sistema operacional diferente do que estamos acostumados, ainda esperamos que haja um \u00edcone para acesso \u00e0 c\u00e2mera, calculadora, hist\u00f3rico de chamadas ou arquivos internos. Similarmente, se um indiv\u00edduo est\u00e1 fazendo um tratamento dent\u00e1rio e, inesperadamente, precisa se mudar para outro pa\u00eds, ele pode esperar que seu tratamento seja conclu\u00eddo no exterior, afinal o novo dentista deveria saber aplicar t\u00e9cnicas semelhantes ao profissional atenrior. Da mesma forma, se dois laborat\u00f3rios realizarem exatamente o mesmo exame, o ideal \u00e9 que se possa esperar um resultado significativamente similar.<\/p>

Essa consist\u00eancia n\u00e3o vem por acaso. A padroniza\u00e7\u00e3o de procedimentos garante estabilidade e confian\u00e7a aos mais diversos processos, e permite que resultados gerados por diferentes vias possam ser comparados. Na ci\u00eancia, isso \u00e9 particularmente importante. Para que possamos comparar resultados entre pesquisas, \u00e9 necess\u00e1rio que elas tenham sido realizadas com metodologias similares. Caso contr\u00e1rio, o n\u00famero de vari\u00e1veis que pode ter influenciado nos resultados obtidos \u00e9 grande demais, e n\u00e3o ser\u00e1 poss\u00edvel fazer infer\u00eancias a partir da compara\u00e7\u00e3o. A pr\u00f3pria idealiza\u00e7\u00e3o do m\u00e9todo cient\u00edfico traz o conceito de reprodutibilidade, pelo qual todo experimento cient\u00edfico precisa ser feito e descrito de forma que possa ser repetido por terceiros, que poder\u00e3o testar as mesmas hip\u00f3teses usando m\u00e9todos similares para confirmar as conclus\u00f5es do experimento original. Portanto, a padroniza\u00e7\u00e3o nos procedimentos cient\u00edficos \u00e9 essencial. Para que essa consist\u00eancia esteja presente nos laborat\u00f3rios de biologia, s\u00e3o necess\u00e1rios estudos extensos e aprofundados das metodologias existentes para cada etapa dos protocolos. \u00c9 preciso que diversos m\u00e9todos e ferramentas sejam testados em um mesmo contexto, para que as melhores op\u00e7\u00f5es sejam descobertas e fixadas para todos os experimentos naquele contexto no qual foram realizados os testes. Isso pode levar de v\u00e1rios meses a anos, dependendo do protocolo. Para algumas \u00e1reas da ci\u00eancia, no entanto, isso pode ser tempo demais.<\/p>\t\t\t\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t\t\t<\/div>\n\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t<\/div>\n\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t<\/section>\n\t\t\t\t

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Atualmente, uma das principais \u00e1reas de estudo do GIA est\u00e1 relacionada com a aplica\u00e7\u00e3o de t\u00e9cnicas e ferramentas de an\u00e1lise de DNA ambiental (eDNA) para avalia\u00e7\u00e3o de ambientes aqu\u00e1ticos. O DNA ambiental nada mais \u00e9 que o material gen\u00e9tico liberado continuamente por organismos em seu meio atrav\u00e9s de c\u00e9lulas, esporos, muco, secre\u00e7\u00f5es, folhas, fezes, entre outros materiais que se desprendem durante as atividades cotidianas dos seres vivos. O rastreamento desse material gen\u00e9tico atrav\u00e9s de t\u00e9cnicas moleculares representa uma das \u00e1reas mais modernas da biologia atual. Essa t\u00e9cnica relativamente recente tem sido adaptada para elucidar uma s\u00e9rie de demandas ambientais e vem sendo praticada por um n\u00famero crescente de pesquisadores, empresas e grupos de pesquisa. Com o avan\u00e7o da pesquisa na \u00e1rea, novos caminhos est\u00e3o se abrindo no estudo de esp\u00e9cies raras e amea\u00e7adas, na detec\u00e7\u00e3o precoce de esp\u00e9cies invasoras, no monitoramento biol\u00f3gico e nas estimativas de biodiversidade. A pesquisa com eDNA \u00e9 t\u00e3o promissora e atrativa que seu avan\u00e7o se d\u00e1 de forma extremamente r\u00e1pida, com novos m\u00e9todos, materiais, ferramentas e aplica\u00e7\u00f5es surgindo constantemente. Como consequ\u00eancia, o processo de padroniza\u00e7\u00e3o encontra grandes dificuldades. Com op\u00e7\u00f5es que se ampliam constantemente, fica impratic\u00e1vel testar e validar um protocolo de eDNA extenso, pois ele se torna ultrapassado antes mesmo de ser lan\u00e7ado.<\/p>\t\t\t\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t\t\t<\/div>\n\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t<\/div>\n\t\t\t\t\t<\/div>\n\t\t<\/section>\n\t\t\t\t

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Outra dificuldade na padroniza\u00e7\u00e3o de protocolos de eDNA se materializa na complexidade de sua natureza. O comportamento do DNA em ambientes aqu\u00e1ticos funciona de maneira \u00fanica em cada situa\u00e7\u00e3o. As taxas de libera\u00e7\u00e3o e degrada\u00e7\u00e3o de DNA na \u00e1gua variam de acordo com muitos fatores abi\u00f3ticos como temperatura, intensidade de luz, turbidez, movimenta\u00e7\u00e3o da \u00e1gua, pH, tempo de exposi\u00e7\u00e3o no ambiente, entre outros, e bi\u00f3ticos, como biomassa do organismo, per\u00edodo do ciclo reprodutivo, e a pr\u00f3pria varia\u00e7\u00e3o entre esp\u00e9cies. Por isso, cada protocolo atualmente \u00e9 feito para um \u00fanico grupo taxon\u00f4mico em um \u00fanico contexto (\u00e1guas turvas ou l\u00edmpidas, rios ou lagos, \u00e1gua doce ou salina), e a generaliza\u00e7\u00e3o por enquanto n\u00e3o \u00e9 vi\u00e1vel.<\/p>

O dinamismo intenso gerado pela grande variedade de m\u00e9todos dispon\u00edveis se torna um problema em duas frentes: i) na pesquisa cient\u00edfica, dificulta a avalia\u00e7\u00e3o e escolha das metodologias por parte de pesquisadores e gera uma enorme varia\u00e7\u00e3o nos trabalhos publicados sobre eDNA. ii) na \u00e1rea comercial, impede o estabelecimento de normas, diretrizes e boas pr\u00e1ticas no fornecimento de servi\u00e7os por parte de empresas, uma vez que a grande varia\u00e7\u00e3o nos m\u00e9todos torna imposs\u00edvel obter uma certifica\u00e7\u00e3o espec\u00edfica para as an\u00e1lises oferecidas. Considere a seguinte compara\u00e7\u00e3o: a r\u00e1pida expans\u00e3o das tecnologias de comunica\u00e7\u00e3o (redes sociais e outras m\u00eddias digitais) traz in\u00fameras vantagens \u00e0 sociedade. Por\u00e9m, ao mesmo tempo, surgem problemas in\u00e9ditos no campo do direito e da \u00e9tica, como a liberdade de express\u00e3o e a seguran\u00e7a virtual dos usu\u00e1rios. Essas \u00e1reas da tecnologia s\u00e3o muito recentes e crescem em uma velocidade estonteante, de forma que governos e autoridades ainda n\u00e3o puderam definir claramente regula\u00e7\u00f5es de conte\u00fado e legisla\u00e7\u00f5es a respeito. A pesquisa com eDNA avan\u00e7a de forma semelhante: rapidamente e com pouco controle.<\/p>

O eDNA ainda tem um longo caminho a percorrer at\u00e9 que essas dificuldades sejam contornadas. Recentemente, alguns estudos v\u00eam trazendo compara\u00e7\u00f5es diretas entre diferentes protocolos e avalia\u00e7\u00f5es de abordagens alternativas, na tentativa de trazer simplicidade e previsibilidade ao processo de escolha de metodologias. Mas esses estudos ainda s\u00e3o raros e limitados. Para o futuro, podemos esperar grandes avan\u00e7os no estudo da bioqu\u00edmica do eDNA, bem como novas abordagens capazes de contornar essa grande varia\u00e7\u00e3o dos protocolos atrav\u00e9s de t\u00e9cnicas abrangentes como o multiplexing (an\u00e1lise de detec\u00e7\u00e3o com dois ou mais alvos na mesma rea\u00e7\u00e3o) e o metabarcoding (an\u00e1lise generalista com sequenciamento gen\u00e9tico). Apesar da grande complexidade envolvida na consolida\u00e7\u00e3o de metodologias nessas \u00e1reas de r\u00e1pida expans\u00e3o, tais t\u00e9cnicas v\u00eam constantemente ganhando espa\u00e7o na ci\u00eancia e nos governos, contibuindo cada vez mais no direcionamento das pol\u00edticas de gest\u00e3o ambiental.<\/p>

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Refer\u00eancias <\/strong><\/p>

Trujillo\u2010Gonz\u00e1lez, Alejandro, et al. “Considerations for future environmental DNA accreditation and proficiency testing schemes.” Environmental DNA (2021).<\/p>

Kumar, Girish, et al. “One size does not fit all: Tuning eDNA protocols for high\u2010and low\u2010turbidity water sampling.” Environmental DNA (2021).<\/p>

Troth, Christopher R., et al. “Seasonality, DNA degradation and spatial heterogeneity as drivers of eDNA detection dynamics.” Science of the Total Environment 768 (2021): 144466.<\/p>

Thalinger, Bettina, et al. “The effect of activity, energy use, and species identity on environmental DNA shedding of freshwater fish.” Frontiers in Ecology and Evolution 9 (2021): 73.<\/p>

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